Zeitschrift für Forensische Medizin

Erweiterung der PCR mit dem Spurenelement

Abstract

Katsuya Honda, Hisanori Muramatsu und Yukiko Sugano

Für forensische DNA-Tests müssen wir häufig DNA-Analysen aus sehr kleinen Probenmengen von schlechter Qualität durchführen. Infolgedessen sind die Proben ohne PCR oft nicht testbar. Um dieses Problem zu lösen, haben wir nach einem Spurenelement mit katalytischer Wirkung für die PCR gesucht. 13 Arten der folgenden Elemente wurden untersucht: Si, Pb, V, Zn, Cu, Cd, Ca, Bi, Tl, Sn, Hg, Se. As. Die Konzentration des Spurenelements in der endgültigen PCR-Lösung lag im Bereich von 1 ppb bis 10 ppm und wurde mit der Kontroll-PCR ohne Zusatzstoffe verglichen. Wir konnten eine Beschleunigungswirkung der PCR auf Vanadium und Kupfer nachweisen. Die Zugabe von Vanadium und Kupfer zeigte die höchste Beschleunigungswirkung bei einer Konzentration von 10 ppm von 1 ppm in der Endmischung. Die Kombination aus 10 ppm Vanadium und 1 ppm Kupfer wies die höchste Nachweisrate bei Verwendung von PPY23 zur Personenidentifizierung auf und zeigte, dass die Amplifikation im Vergleich zur Kontroll-PCR um mindestens 4 Zyklen beschleunigt wurde (entspricht einer 32-fachen Mengenerhöhung).